Полимераза верижна реакција (ПЦР) е модерна алатка за дијагностицирање на различни инфекции, кои се карактеризираат со висока точност. PCR анализа ви овозможува да ги одредите патогените заразни болести, врз основа на нивниот генетски материјал (РНК или ДНК). Биолошкиот материјал за студијата може да служи за крв, размачка од генитални органи, плунка и така натаму.

Консултации за резултатите од анализите или ултразвукот - 500 рубли.

ПЦР методот беше отворен во 1983 година. Неговиот Творец на Кери Мулис (САД), за ова откритие ја доби Нобеловата награда во областа на хемијата. Веќе во првите десет години, техниката стана задолжителна лабораториска студија низ целиот свет, откако доби признание за научниците и лекарите.

Диана Медицинскиот центар предлага да спроведе студија за методот на полимераза верижна реакција во најкус можен рок и со највисоко ниво на точност. Нашата дијагностичка база е во согласност со сите меѓународни стандарди и барања.

Кои инфекции може да се дијагностицираат со ПЦР

Испрати до дијагностика, или. Но,нализ ПЦР. Тоа го прави возможно да се дијагностицира голем број разновидни инфекции. Оваа група вклучува скриени, асимптоматски болести во периодот на инкубација:

Виа пЦР метод Можете да откриете:

• хепатитис Ц, Б;
• уреаплазмоза на гениталните органи;
• - уреаплазмоза, трихомонијаза, гардернелоза;
• хламидија генитални органи и респираторниот тракт;
• бактериска вагиноза;
• инфективна мононуклеоза;
• туберкулоза;
• салмонелоза;
• туберкулоза (пулмонални и екстрапулмонални форми);
• лисуриоза, битие-енцефалитис, Лајмска болест;
• , папиломавирус,;
• детски заразни болести откриени за време на бременоста пред концепцијата -, вапатитис, дифтерија, кортекс;
• ХИВ.

Секоја од горенаведените болести откриени од друг метод, препорачливо е да се направи PCR - истражување. Патогените на многу инфекции имаат неколку типови (соеви), а попрецизна дијагностика го прави третманот поефикасно. Бидејќи различни видови на патогени имаат свои начини за пренос на инфекција, точната дефиниција на патогенот помага да се заштитат од инфицирање на другите. На пример, хепатитис А може да биде заразен преку заеднички предмети и јадења (валкана болест на рацете), а хепатитис Ц е само преку крв, медицински инструменти и сексуални контакти. Ова е важно за оние кои се во близина на болните.

Суштината на методот на реакција на полимераза

Методот се базира на откривање на патогенот на ДНК или РНК сајтови. ПЦР потсетува криминализам кога криминалот се наоѓа на честички на кожата или косата оставена на местото на злосторството. Бидејќи секој жив организам има уникатна ДНК или РНК структура. Методот ви овозможува непогрешливо да го идентификувате микроорганизмот, дури и ако е присутен во материјалот под студирање во минималните количини.

RFC е погодна за идентификување на скриени вагони, атипични, избришани и други форми на заразни болести. Дијагнозата се карактеризира со висока точност, па практично не дава грешки и лажни резултати. Анализата често се доделува како дополнителен преглед за да се идентификува специфичен тип на вирус или микроби.

Предностите и недостатоците на ПЦР методот

PCR анализата е резултат на дијагностичка алатка која му овозможува на лекарот не само за правилно да го одреди видот на заразен патоген во телото на пациентот, туку и бројот на микроби. Оваа функција овозможува ПЦР методот ефикасно да ги открие и хроничните инфекции, на пример, вирусен хепатитис.

Предностите на методологијата се меѓу следниве карактеристики:

• Универзалност . Методот овозможува да се одредат сите познати микроорганизми, без оглед на видот на материјалот што се проучува.
• Специфичност . PCR ви овозможува да дефинирате ДНК на вирус или бактерии со точност од 100% што не дава друг дијагностички метод.
• Чувствителност - Дури и еден најмал "чип" на ДНК или РНК може да се открие и идентификува, поради брзата реакција на формирањето на копии.
• Оперативен - Да се \u200b\u200bдијагностицира врз основа на полимераза верижна реакција може да се направи по неколку часа по внесот на биолошки материјал, што овозможува да се продолжи со третманот на болеста.
• Можност за спроведување на квантитативна анализа . Оваа функција е важна кога идентификување на болести предизвикани од условно патогена флора (на пример, дрозд). Зголемена содржина на кандидатите за печурки во телото предизвикува болест и нормален износ до 10 3 - 104 CFU / Tamp. - не.

Недостатоците на PCR дијагностиката се потребата за високо-технолошка опрема и високо квалификувани специјалисти. За анализа, потребна е посебна кутија-ламинарна, каде што се одржува потребната температура и е обезбедена експерименталната чистота.

Како да поминете ПЦР анализа правилно: Подготовка

За да се разбере како треба да се подготви за претстојната анализа на ПЦР, пациентот дефинитивно мора да се разјасни од својот лекар, кој се планира биолошки материјал. Подготовката директно зависи од ова.

• Избор на генитални органи, тест од грлото на матката или уретрата, урина - преку проучување на овие варијанти на материјалот со користење на ПЦР методот, инфекциите на гениталиите се дијагностицирани.
• Вирусен хепатитис Ц, ХИВ инфекцијата бара крв преземање на PCR анализа.
• Со помош на тест од отпадна вода може да се потврди или не го оспори фактот на присуството на инфективна мононуклеоза.

Mazzok кај жени

Да се \u200b\u200bдијагностицираат гениталните инфекции од ПЦР од страна на жените, обично земаат вагината. Во бременоста постојат стандардни правила за подготовка за анализа на ПЦР.

• Неколку дена пред ПЦР, неопходно е да се напушти стиховите, интимни хигиенски производи.
• Една недела пред анализа на инфекции, вреди да се прекине употребата на сите видови на лекови, се разбира, ако тие не се вклучени во Програмата за подготовка за анализа на ПЦР, пропишани од лекарот.
• Неколку дена пред испитувањето, потребно е да почнат да се воздржуваат од сексуален однос.
• Не е неопходно да се измие на денот на анализата на ПЦР, хигиената на гениталните органи се врши во пресрет на вечерта, се користи само топла вода.
• Неколку часа пред доплата е невозможно да се уринира.

Маша во мажите

Да се \u200b\u200bподготви за страв од тест од уретрата за ПЦР е лесно. Едноставно следете ги правилата наведени подолу.

• 2 дена пред ПЦР истражувањата треба да почнат да се воздржуваат од сексуални односи.
• Приемот на лекови е запрено околу 7 дена пред анализата, освен ако, се разбира, тие не беа посебно назначени од страна на лекарот.
• Хигиената на гениталните органи треба да се одржи во пресрет на вечерта, на денот на анализата на ПЦР не треба да го стори тоа.
• Се препорачува да не се уринира околу 2-3 часа пред да се предаде.

Тест на крвта

Ако во процесот на PCR анализата, крвта на пациентот ќе стане предмет на студирање, правилата за подготовка за тоа се како што следува.

• Оптималното време за крв е утрото, анализата мора да го предаде празен стомак (минимум 8 часа не-храна). Водата може да се пие.
• Одбивање на алкохол на ден пред PCR анализа, одбивање да пушат еден час пред него.
• Ако здравјето овозможува таква опција, се препорачува да се одбие да прима лекови од примање на лекови.
• Пред да ги пренесат примероците од крв, околу 20 минути треба да се одморат.
• Во пресрет на ПЦР студии, емоционалните и физичките преоптоварувања се целосно исклучени, тие можат да влијаат на резултатите од анализата.

Како е ПЦР тест?

Секое опкружување се презема за проучување во која може да биде предизвикувачкиот агенс, но најчесто се користи:

• Крвен серум или плазма - да се идентификуваат многу патогени - хепатитис Б, Ц, Д, Г, херпес вируси, ХИВ, цитомегаловирус;
• Сок од урина и простата - во дијагнозата на СПБ;
• Мотика, плеврална течност, бронхолвеоларна лаважа - за дијагноза на пулмонални и екстремни форми на туберкулоза;
• Спинална течност - да ги дијагностицира инфекциите на нервниот систем;
• Калооплна течност - да се утврди интраутерини инфекции;
• Mazz од Зев. - да ги идентификува предизвикувачките агенси на инфективна мононуклеоза и дифтерија;
  скали и удари со мукозни мембрани за дијагностицирање на СПБ;
  клетки на гастричната мукоза и гастричниот сок - за откривање на бактериите на хеликопцентот што предизвикува гастритис и чиреви.

Со едно земање на материјалот, можно е да се открие неколку патогени во телото одеднаш. Таквата универзалност го елиминира пациентот од дополнителни испитувања и вишок трошење.

Откријте и идентификувајте ги деловите на генетските информации, можно е користење на специјални референтни ДНК маркери (буквари) создадени за секој добро познат патоген. Стандардот ви овозможува да го најдете "вашиот" фрагмент меѓу милиони други. Ако се случи ова, реакцијата на полимеразата е лансирана.

ПЦР реакцијата прави огромен број копии од откриениот дел од информациите за ген (репликација). Важно е да се реплицираат само областите на ДНК и РНК за анализа. Затоа, чистотата на експериментот и способноста на персоналот да се справи со опремата и примероците е толку важно.

Реакцијата на синџирот се одвива многу брзо, по два часа, делот ДНК се зголемува во милиони пати, што ви овозможува да откриете и прецизно да ја идентификувате инфекцијата. За работа со стабини, цевките за тестирање се ставаат во посебен уред. Користејќи ја програмата, алгоритмот е поставен, неколку пати менување на температурата на медиумот и влијае на протокот на реакција. Резултатот од ПЦР е видлив веднаш по завршувањето на студијата.

Како да ја дешифрирате PCR анализата

Спроведувањето на ПЦР студии овозможува лесно да се воспостави еден вид на инфекција присутна во телото на пациентот, но исто така и да се процени од квантитативна гледна точка (број на микроби). Дешифрирање на резултатите од квантитативната анализа на ПЦР игра важна улога во откривањето и потврдувањето на ефективноста на третманот на голем број хронични болести, велат хепатитис Ц.

Резултатот од PCR анализата може да биде позитивен и негативен одговор.

• Негативен резултат . Трагите на инфекција не беа откриени во биолошкиот материјал, што беше предмет на истражување во процесот на анализирање на ПЦР. Како по правило, врз основа на негативен резултат, може да се претпостави дека во телото навистина нема инфекција.
• Позитивен резултат. Овој резултат на анализирање на ПЦР сугерира дека трагите на заразни болести се присутни во биолошкиот материјал на пациентот. Позитивниот резултат на PCR анализата се карактеризира со голем степен на прецизност.

Понекогаш инфекцијата е откриена против позадината на целото здравје и отсуство на знаци на болеста. Некои пациенти веруваат дека анализата е неправилно, но фактичката состојба е поинаква. Ако ПЦР покажа дека предизвикувачкиот агенс во телото е, тоа значи дека тој е навистина лоциран таму. Само заразни болести никогаш не започнуваат веднаш по инфекцијата, со инкубациски период на различно времетраење.

Скриениот период може да продолжи многу долго време, на пример, со СИДА - неколку години, додека некои механизми туркаат вируси за репродукција. Каузативниот агент е определен во телото на превозниците и оние кои не се согледувале. Многу често одат на латентна (латентна) од различни СПБ. Во овој случај може да биде потребна дополнителна лабораториска дијагностика.

Точност на декрипција на резултатите од анализата на ПЦР

ПЦР методот, кој овозможува да се идентификува доволно голем број на инфекции, се карактеризира со зголемена точност, чувствителност и специфичност. Овие карактеристики укажуваат на тоа дека со помош на студијата ПЦР, можете:

• Максимално прецизно утврдување на отсуство или присуство на заразен патоген.
• Максимално точно го одредуваат специфичниот тип на заразен патоген (специфичност).
• Да се \u200b\u200bидентификува инфекцијата дури и кога има скриен карактер. Зборуваме за ниско ниво на присуство во биолошки материјал на микроби (чувствителност) пациент под истрага.

Предностите на ПЦР методот над анализа на имунофер и други имунолошки инструменти за идентификација на инфекцијата е тоа што е помалку веројатно да се направат погрешни резултати. Тоа е, декодирање на PCR анализа е значително поретко го покажува отсуството на заразни микроби ако тие се во телото на пациентот.

Покрај тоа, речиси не се случи дека декодирањето на анализата го открива присуството на непостоечка инфекција во телото, односно даде лажни позитивни резултати. Не е можно да се повикаат 100% точни ПЦР резултати, Значи, невозможно е да се дополни оваа студија од други техники.

Опис

Полимераза на верижна реакција (полимераза верижна реакција, ПЦР, ПЦР) измислена американска биохемија Кери Б. Мулис во 1983 година. Во 1993 година, за ова откритие, му беше доделена на Нобеловата награда.

Денес, апликациите на ПЦР како модерен метод на молекуларна биологија се екстремно широк. Посебно место за дијагностицирање на ПЦР е во медицинска пракса. И причината за ова е прилично едноставна: полимеразата верижна реакција го прави невозможно.

Често дијагнозата на ПЦР е фигуративно опишана како метод со кој можете да најдете игла во сено, а потоа да изградите куп на овие игли. "Игла" е мал фрагмент на генетски клетки (ДНК или РНК).

Така, откривањето на овој метод е еден од најистакнатите настани во областа на молекуларната биологија во изминатите децении. Развојот на ПЦР методот овозможи медицинска дијагноза како целина да се зголеми на квалитативно ново ниво.

Основи на ПЦР.

Основата на методот - повеќекратно селективно копирање (засилување) на одреден дел од ДНК со цел да се добие таков број на генетски материјал, кој ќе биде доволен за откривање на визуелна детекција. Во исто време, само даден дел од ДНК е постојано копиран (засилен), под услов да е присутен во студираниот биоматеријал.

Покрај тоа, студијата, покрај едноставно зголемување на бројот на копии од ДНК секциите, овозможува и други манипулации со генетски материјал. Затоа, методот е широко користен во научните истражувања, биолошката и медицинската пракса: во дијагностиката на заразни и наследни болести, при идентификување на мутации, генотипирање, воспоставување на татковство, идентификација на личноста итн.

ПЦР во дијагностицирање на заразни болести

Денес, ПЦР дијагнозата на инфекции е една од најточните, чувствителни и ефикасни клинички лабораториски методи. Покрај тоа, спектарот на патогени за откривање е речиси неограничен - ќе се развива тест систем за PCR анализа на посакуваниот патоген.

Поради својата висока чувствителност, ПЦР ви овозможува да го идентификувате патогенот дури и ако тоа е минимална содржина (што е, постојат само неколку молекули од нејзината ДНК во студираниот биоматеријал).

ПЦР открива патогени заразни болести кога е невозможно да се направат други методи (имунолошка, култура, микроскопска). Затоа, за голем број на инфекции на инфекции, методот на полимераза верижна реакција стана "златен стандард", тој се тестира со време и тестирани клинички. Во современата лабораториска дијагноза на ПКР заразни болести е најчувствителниот и специфичен метод за директно откривање на патогени. Ова не овозможува не само да се воспостави етиологијата на болеста, туку и да го контролира текот на инфективниот процес и да се оцени ефективноста на извршениот третман.

Анализата на ПЦР методот е особено релевантна во асимптоматскиот проток на инфективен процес предизвикан од одредени патогени микроорганизми (хламидија, квалитативна дефиниција на ДНК; микоплазма, квалитативна дефиниција на ДНК; предизвикувачки агенс на гонореа, квалитативна дефиниција на ДНК; трихомоноза патоген, квалитативна дефиниција на ДНК). На пример, во хроничен гонор, жените дури и со помош на бактериолошки метод често не можат да бидат идентификувани од гонококк, и покрај достапните симптоми на хроничниот воспалителен процес во грлото на матката или уретрата.

Современата PCR дијагностика овозможува не само да го идентификува генетскиот материјал на инфекции на инфекции, туку и да ги утврди концентрациите на нивната ДНК / РНК (квантитативен формат на студијата). Одредувањето на износот на патогени е од суштинско значење за решавање на прашањето за назначување третман, особено ако условно патогени микроорганизми (микоплазма, квантитативно определување на ДНК; пишување уреаплазма, квантитативно определување на ДНК).

Една од главните насоки за развој на PCR методот е повеќепериум формат развиен во CMD, што овозможува да се идентификуваат неколку патогени во една цевка (и една реакција).

• Неизити на инфекции пренесени од Ixodic крлежи

ПЦР дијагностика на хепатитис

Во моментов, се познати најмалку 5 вируси, чија способност да предизвика оштетување на црниот дроб е докажано. Ова е патогени на хепатитис А, Б, Ц, Д, Е. Во ретки случаи, хепатитис може да биде предизвикан од епштајн-бар вируси и едноставни херпес. Способноста да го погоди црниот дроб на таквите агенти како TT вируси и хепатитис G денес не е признаена од сите. Сите овие вируси се однесуваат на различни семејства, имаат различни биолошки својства и, според тоа, тактиката на третман исто така ќе се разликува значително во зависност од етиологијата на хепатитис.

Со оглед на погоре, многу релевантен проблем е соодветна етиолошка дијагноза на вирусен хепатитис со идентификување на специфичен патоген. Без употреба на современи молекуларни биолошки методи, ова е невозможно. Затоа, дијагнозата на хепатитис со методот на полимераза верижна реакција е еден од најважните чекори во утврдувањето на причината за болеста и утврдување на дополнителни тактики на третманот.

ПЦР во дијагностиката на ХИВ инфекција

Во моментов, најприфатливиот и истовремен чувствителен пристап се користи за лабораториска дијагноза на ХИВ инфекцијата - откривање на антитела на антитела на ХИВ со користење на ензимски имуноасалност (ELISA) - проследено со потврдување на позитивните резултати од анализата со имунобултирање (IB). Ефективноста на идентификувањето на лицата заразени со ХИВ, со помош на овој пристап може да достигне 99% или повеќе.

Но, серолошката дијагноза на ХИВ инфекцијата има голем број на ограничувања:

1. Неефикасност во периодот на т.н. "Серолошки прозорец" (во првите недели по инфекцијата, антитела не се откриени поради нивното отсуство или ниска концентрација).
2. ХИВ антитела за долго време се откриваат од сите деца родени од ХИВ-инфицирани мајки.
3. Лажни позитивни резултати на Елиза поради присуството во крвта на антителата на антигени слични на ХИВ антигените.
4. Лажни негативни и сомнителни резултати на Елиса и имунобултирање (особено кај пациенти во терминалната фаза на болеста).

Затоа, ПЦР тестовите за време на истражувањето за ХИВ инфекција денес стануваат се повеќе и повеќе. Според "методички препораки за спроведување на ХИВ испитување" (апликација при испитување на децата родени од ХИВ-инфицирани мајки, или пациенти во периодот "Серонегативен прозорец", се користи ПЦР методот, кој го детектира генскиот материјал на ХИВ ... .. ". И во случај на веќе воспоставена дијагноза на ХИВ инфекција, анализата на ПЦР методот се користи за предвидување, динамично набљудување и следење на терапијата.

• Човечка имунодефициенција Вирус квалитативна дефиниција на провирус ДНК, ПЦР
• Човечка имунодефициенција вирус квантитативна дефиниција на РНК, ПЦР
• Сеопфатна дијагностика: Висококвалитетна дефиниција на вирусот вирус вирус на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на вирусот на хуманиот имунодефициенција (ХИВ) 1 и 2

Во центарот на молекуларната дијагностика (CMD) можете да ја предадете PCR анализата на ХИВ анонимно.

Полимеразата верижна реакција е веќе позната по 30 години. Широко се користи во многу области, почнувајќи од археологија и завршувајќи со генетиката.

Тоа е PCR метод кој помага да се воспостави татковство, но најчесто се користи за идентификување на разни заразни болести во човечкото тело.

Како да се анализира ПЦР методот, и што е тоа? Ние ќе се обидеме детално да одговориме на овие прашања.

ПЦР анализа - што е тоа?

Полимераза верижна реакција (ПЦР) е висок прецизен молекуларен генетски дијагностички метод, кој ни овозможува да идентификуваме разни заразни и наследни болести, и во акутната и хронична сцена и долго пред болеста да се покаже.

ПЦР методот е апсолутно специфичен и правилно не може да даде лажен позитивен резултат. Тоа е, ако не постои инфекција, тогаш анализата никогаш нема да покаже дека е. Затоа, сега е многу често за одобрување на дијагнозата, анализата на ПЦР се додава за да се утврди патогенот и неговата природа.

Полимеразата верижна реакција (ПЦР) во 1983 година беше развиена од Кери Мулис (САД), за која во 1993 година му беше доделена Нобеловата награда во областа на хемијата.

Која е предноста на овој метод?

Дијагнозата на овој метод ви овозможува да го пронајдете патогенот директно во генот, кој е содржан во материјалите што се студираат. Ова е најточна анализа на инфекции на половите, скриените инфекции, разни венерични болести.

Разлики на ПЦР дијагностика од други методи на лабораториски истражувања Тие се како што следува:

• методот е насочен кон идентификување на самиот патоген;
• дијагнозата на ПЦР методот се одликува со универзалност: за откривање на патогените од неколку;
• болестите се доволни само еден биолошки примерок на пациентот;
• методот има висока чувствителност и не е придружена со други вкрстени реакции.

Покрај тоа, предноста на ПЦР дијагностиката е дека секој биолошки материјал на пациентот е погоден за анализа: крв, одвојување од генитални органи, урина, сперма.

Кои инфекции овозможуваат да се открие тест на ПЦР?

Во телото може да има голем број на предизвикувачки агенси за инфекции, и тука вклучуваат "скриени", кои за долго време не се покажуваат.

Анализа на тест на ПЦР ви овозможува да ги идентификувате таквите инфекции:

• revezmosis на гениталните органи;
• кандидијаза ();
• херпес;
• присуство на клетки на ракот;
• оценка на хормоналната држава;

Проучуваниот материјал за ПЦР обично е спутум, плунка, урина, крв. Пред анализирањето, неопходно е внимателно да се подготви за тоа, откако добиле прелиминарна консултација со лекар.

Крвта за ПЦР обично се откажува од празен стомак. Добри резултати покажуваат анализа кога материјалот за истражување е земен од цервикалниот канал или уретрата. Во овој случај, најдобро е да се спроведе ПЦР дијагностика не подоцна од еден ден по сексуалниот однос.

ПЦР сорти

ПЦР се користи во многу области за анализи и во научни експерименти. Постојат различни техники за анализа:

1. ПЦР со обратна транскрипција (Обратна транскрипција PCR, RT-PCR (ENG.)) - Се користи за засилување, избор или идентификација на позната секвенца од списокот на РНК.
2. Превртена ПЦР. (Инверзна PCR (англиски)) - се користи ако само мал дел е познат во посакуваната секвенца. Овој метод е особено корисен кога е неопходно да се одредат соседните секвенци по вметнувањето на ДНК во геномот.
3. Вгнездени ПЦР (вгнездени ПЦР (ENG.)) - Се користи за намалување на бројот на нус-производи од реакцијата. Користете два пара буквари и спроведете две последователни реакции.
4. Асиметричен PCR. (Eng. Asymmetric PCR) - се изведува кога е неопходно да се засили главно еден од синџирите на оригиналната ДНК. Се користи во некои методи за секвенционирање и анализа на хибридизација.
5. Квантитативен ПЦР. (Квантитативен ПЦР, Q-PCR (англиски)) или ПЦР во реално време - се користи за директно следење на мерењето на износот на специфичен PCR производ во секој реакциски циклус.
6. Чекор PCR (Touchdown PCR (англиски)) - Со помош на овој пристап, намалување на ефектот на неспецифичен буквар врзување.
7. Специфични ПЦР. (PCR специфични PCR) - ПЦР за сродни секвенци во рамките на еден или помеѓу различни типови, користејќи ги конзервативните прајмери \u200b\u200bна овие секвенци.

Ако секвенцата на нуклеотид на матрицата е позната во дел или непозната воопшто, можете да користите дегенерирани прајмери \u200b\u200bчиј редослед содржи дегенерирани позиции во кои може да се лоцираат сите основи. На пример, секвенцата на буквар може да биде вака: ... ат ..., каде што H-A, T или C.

Кои биолошки материјали се испитуваат?

Материјалот за студијата ПЦР, во која е можно да се идентификуваат туѓите ДНК на бактерии или ДНК или РНК на вирусот може да бидат различни биолошки медиуми и човечки флуиди:

1. Вода Може да се користи во инфективната штета на уринарниот тракт кај мажите и уринарните тела кај жените (мажите го користат епителниот гребен како уринарен материјал).
2. Мочоус. Се користи за дијагностицирање на туберкулоза и поретко за дијагностицирање на респираторните форми на хламидија и микоплазмоза. Влажното во износ од 15-20 ml се собира во стерилни (за еднократна употреба) вијала.
3. Биолошки течности. Сок од простата, плеврални, 'рбетници, вретено, оследноста, артикуларната течност, бронхолвеоларна лаважа, плунка се затворени со сведочења.
4. Епителни падини со мукозни мембрани. Обично се користи за дијагностицирање на сексуално преносливи болести (СПБ), како што се гонореа, кламидија, микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомонијаза, гардилоза, херпетички и други инфекции кои влијаат врз мукозните мембрани.
5. Биопати. Најчесто се користат биоплати на стомакот и дуоденалната црева за да се идентификува инфекцијата со хеликоптери.
6. Крв, плазма, серум. Се користи за PCR анализа на хепатитис Б, Ц, Д, Г, херпес вируси, ЦМВ, ХИВ, човечки генски истражувања.

Како да се подготвите за доплата?

Сигурноста на резултатот од ПЦР директно зависи од точноста на материјалот за испитување. Материјалот не треба да се контаминира, инаку резултатот од студијата нема да биде објективен. Најважните препораки пред да се донесат анализата на ПЦР ги вклучуваат следните барања:

1. Урината е предадена во утринските часови во стерилен контејнер.
2. Тестот за крв на инфекции мора да биде предаден на празен стомак наутро.
3. Не е неопходно да се оствари сексуална активност на ден пред анализата.

Резултатот од анализата ќе биде подготвен по 1,5-2 дена по разгледувањето на постапката. Постојат ситуации како кога резултатот може да се подготви истиот ден.

Дешифрирање на анализата на ПРП

Процесот на толкување на презентираните студии се карактеризира со неговата едноставност. Резултатите од PCR анализата може да се добијат по 1,5-2 часа по испораката на материјалот. Во некои случаи, резултатот е подготвен на првиот ден, и тоа е она што тие можат да значат:

• Негативен резултат Тоа покажува дека во дијагностициран материјал не постои посакуван заразен патоген.
• PCR позитивен Покажува дека постои ДНК или РНК на каузативниот агент во човечкото тело.

Во некои случаи, квантитативното определување на микроорганизми произведуваат. Ова е особено точно за болестите предизвикани од условно патогени микроорганизми. Бидејќи овие бактерии го изложуваат негативното влијание само со прекумерни количини.

Исто така, квантитативната анализа на ПЦР е важна за изборот на терапевтски тактики и за контрола на третманот на таквите вирусни инфекции како вируси за ХИВ и хепатитис.

Колку точна ПЦР дијагноза на инфекции?

ПЦР методот се карактеризира со висока точност, специфичност и чувствителност. Ова значи дека оваа анализа е способна за:

• точно го одредува присуството или отсуството на инфекција;
• точно укажуваат на тоа дека ова е токму оваа инфекција (специфичност);
• откријте инфекција дури и со многу ниска содржина на ДНК на микроби во биолошки материјал,
• кој беше изложен на истражување (чувствителност).

ПЦР анализа: цена и услови

Цената на одредена анализа ќе зависи од која инфекција ќе бидете проверени. Приближно цени и рокови:

1. СТИ: 300-500 Бришење, рокови - 1 ден;
2. Епштајн-Бара вирус, вирус на човечки папилома, херпес, цитомегаловирус: 300-500 рубли, рокови - 1 ден;
3. Хепатитис А, Б, Ц, Д, Г: Квалитативна анализа на 650 рубли, квантитативна анализа на 2000 рубли. Рокови - до 5 дена;
4. Антитела за вирус на хепатитис Ц, вкупно (Анти-ХЦВ) - 420 рубли;
5. Антитела за хепатитис Ц, ИГМ (Анти-ХЦВ ИГМ) - 420 рубли;
6. Helicobacter Pylori: 300-400 рубли, рокови - 1 ден;
7. ХИВ (антитела и антигени) - 380 рубли;
8. РНК ХИВ, висок квалитет - 3.500 рубли;
9. РНК ХИВ, квантитативно - 11.000 рубли.

За да заштедите пари, можете да изберете фиксен тест пакет. Оваа услуга обезбедува поголем дел од клиниките каде што можете да ја пренесете анализата од страна на RFC (Invitro, Onclinite, итн.).

Дијагнозата на заразни болести - бактериски и вирусни - е насочена кон рано откривање на патогени, што овозможува да се препише раната и најефикасната терапија. Најнапредниот метод за дијагностицирање на инфекции е PCR или полимераза верижна реакција. Значи, што е овој метод, и зошто ви треба?

Суштината на полимераза реакција

Секој микроорганизам и вирусот содржат ДНК или РНК молекула во својата структура. Секоја од овие овие соединенија е уникатен, затоа, ако одвоивте во анализата на крв кај деца или возрасни нуклеински киселини, можете да дијагностицирате со апсолутна точност.

За жал, концентрацијата на ДНК во крвни примероци или други биолошки материјали е прилично ниска и користењето конвенционални дијагностички методи не е можно. За да се справи со овој проблем, беше измислена реакција на полимераза.

Суштината на ПЦР лежи во посебниот третман на примерокот на крвта, како резултат на што се зголемува концентрацијата на ДНК на молекулите, дефиницијата за која во иднина ви овозможува да го поставите типот на патоген и дијагностицирање.

Како да поминете крв на ПЦР

Кога се подготвува за анализа, треба да се следат општи препораки: не пијте, а не директно пред анализата на крвта. Иако не е неопходно да се следат овие барања за крвта на ПЦР, толку строго, бидејќи точноста на студијата не зависи од тоа дали анализата е преземена на целосниот или гладен стомак.

Кои болести може да се открие со PCR

Со PCR, можете да ги идентификувате речиси сите вирусни и бактериски болести. Не само крвта се користи за анализа, туку и други биолошки материјали: сперматозоиди, плунка, удари од уретрата и од грлото на матката. Тестот за крв ќе биде информативен ако патогенот на одредена болест продира во крвта на една личност. Затоа, ПЦР крвта е пропишана со следните болести:

• вирусен хепатитис А, Б, Ц, Д и ТТ;
• цитомегаловирус;
• инфекција со херпез (херпес вируси 1, 2 и 4 видови);
• ХИВ инфекција
• entrovirus инфекција;
• ќерамиди;
• рубеола;
• токсоплазмоза;
• инфективна мононуклеоза;
• лисуриоза.

Ако ја земете во предвид можноста за спроведување на ПЦР од други биоматеријали, тогаш во листата на болести откриени од ПЦР, додадете:

• gardnerelloss;
• салмонелоза;
• (околу 100 различни човечки папиломавични вируси);
• трихомонијаза;

Особено е релевантно во моментов PCR анализа на крвните бремени жени на т.н.: цитомегаловирус, токлоплазмоза, рубеола и. Ова се должи на фактот дека наведените болести може да доведат до аномалии на развојот на фетусот.

Предности на ПЦР.

Недостатоци на анализа

ПЦР е високо-технолошки истражувачки метод и ги става високите барања за опремата на лабораторијата. Собата каде што е направена анализата мора да биде опремена со филтер за биолошки чистење, бидејќи честичките на кожата постојано се присутни, плунката содржи ДНК молекули во нивниот состав. Неуспехот да се почитува биоматеријалната работа може да предизвика неточен резултат.

Крвен тест - декодирање кај возрасни (ПЦР)

Толкувањето на резултатите од оваа студија не претставува тешкотии, бидејќи не постои табела за анализа на анализа на крв на ПЦР. Само две фрази може да се појават во образецот:

• негативниот резултат е патогенот на кој беше спроведена анализата не беше идентификувана;
• позитивен резултат - во телото постои предизвикувачки агенс на наведената болест.

Треба да се знае дека ПЦР може да биде позитивен дури и во отсуство на клинички симптоми на болеста! Дешифрирањето на крвниот тест на ПЦР кај деца не се разликува од оние кај возрасните.

Кој треба да биде предаден на ПЦР

Секој може да ја предаде крвта за истражување. Директна индикација за студијата е да се сомнева за сексуално преносливи инфекции (, Gardnerelloss, ХИВ инфекција). Со случајно незаштитен сексуален контакт, само ПЦР ќе помогне да се направи дијагноза во рана фаза, ако лицето стана заразено со било која болест. Во задолжително, крвта на факелот е бремени жени. Како и жените, само.

Во повеќето случаи, пациентите треба да се справат со таква ситуација кога ПЦР е потребен за испитување или определување на болеста. Важно е да се разбере дека тоа претставува и за она што е потребно.

Методот на реакција на полимераза (ПЦР) е студија која помага да се идентификуваат многу болести во почетните фази на развој. Неговата суштина лежи во изнаоѓање ДНК или РНК на патогенот присутен во телото. PCR ви овозможува да го одредите патогенот во случаи кога другите видови истражувања се неефикасни.

Популарноста на овој метод се состои од едноставност и ширина на употреба. Клиничарите се користат за дијагностицирање на разни болести. Ви овозможува брзо да извршите комплексни квантитативни и геномски истражувања.

Една од најважните медицински апликации на класичниот ПЦР метод е откривање на микроорганизми кои се способни да предизвикаат патолошки услови.

Суштината на анализата на ПЦР.

ПЦР дијагностика (она што е објаснето со молекуларната биологија) е методот на молекуларно клонирање кој се користи за анализа на кратката ДНК секвенца, која е присутна во минималните количини во примероци кои содржат било кој генетски материјал. Овој метод често се нарекува "ДНК копир".

ПЦР дијагностиката се изведува in vitro (надвор од телото) во лабораторијата и се базира на природниот процес на удвојување на ДНК пред нејзината поделба. Во прилог на способноста за откривање на вирусот, бактеријата или други микроорганизми во примерокот, PCR ви овозможува да го идентификувате нивниот број.

Во случај на болести како што се инфекција со вирусот на хепатитис Ц или вирусот на хумана имунодефициенција (ХИВ), вирусното оптоварување е добар показател во која фаза е болеста и колку е ефективна терапија.

Вооружени со оваа информација, лекарите можат да одредат кога треба да се започне со третманот, како и следење на самиот процес. Ова ви овозможува да креирате индивидуален пристап за секој пациент.

ПЦР дијагностиката вклучува три фази, од кои секоја од бројот на целта на ДНК понекогаш се зголемува. Како резултат на таквата реакција, се добиваат повеќе од една милијарда копии од оригиналната или "целта" ДНК, што овозможува да се процени присуството на вирус во телото. Ова е главната сопственост на ПЦР методот.

Предности и недостатоци на методот

ПЦР дијагностика (што е, што е, кое е горе погоре) беше опишано во детали Кери Мулис во 1983 година. Оттогаш, методот е од голема популарност во лабораториската пракса.

Главните предности на овој тип на истражување е:

• разновидност;
• брзи резултати;
• голема веројатност за добивање на сигурни резултати;
• специфичност;
• разновидноста на болести кои може да се утврдат.

Разновидноста на методот ПЦР се состои во можност за користење на било какви физиолошки материјали на лице. Дури и една коса е доволна за да се анализира.

Процесот на обработка на податоци, благодарение на автоматизацијата, може да потрае неколку часа. Специфичноста е да се нагласи специфичен ДНК фрагмент карактеристичен за одреден патоген. Со помош на PCR анализа, многу болести може да се дијагностицираат, и во фазите на влошување и во фазите на скриениот проток.

Но, и покрај огромната количина на предности, начинот на дијагностицирање на ПЦР има недостатоци:

• веројатност за лажни позитивни резултати;
• висока чувствителност;
• варијабилност на микроорганизмите.

Главниот недостаток на методот се состои во неможноста на ПЦР да ги разликува живите микроорганизми од мртвите. Како по правило, ова се однесува на ситуација во која треба да се процени успехот на третманот. Во овој случај, ако болеста е третирана, тогаш мртвите клетки се уште се во човечкото тело и за целосна ажурирање потребно е извесно време од 4 до 6 недели.

Високата чувствителност е предност и во исто време недостаток. Некои микроорганизми во мали количини се присутни во телото. Затоа, во овој случај, овој дијагностички метод не е информативен, и се препорачува да се користат други видови истражувања.

Сите микроорганизми можат да мутираат. И покрај тоа што во процесот на засилување се користи специфичен фрагмент, кој е најмалку предмет на промена, сепак може да се стекне со мутации и да стане невидлив за системот за тестирање. Оваа ситуација го објаснува фактот дека различни лабораториски системи за тестирање можат да покажат апсолутно различни резултати.

Во кои области се користи методот

ПЦР студијата може да се примени во клиничката пракса за да се идентификуваат разни болести. Широко се користи во гинекологијата, урологијата, гастроентерологијата, онкологијата, итн. Покрај тоа, ефикасно се применува во судска форензика и во воспоставувањето на татковство.

Овој тип на истражување се користи во фазата на планирање и за време на бременоста. Анализата на факел е спроведена со цел да се идентификува присуството на инфекција во телото на една жена. Болестите предизвикани од една од инфекциите може да се појават во светлосна форма за жена, но да предизвикаат сериозни вродени фетални дефекти, до неговата смрт.

Исто така, дијагностичкиот метод на ПЦР помага да се утврди човечката генетска предиспозиција на развојот на одредени болести во иднина.

Кои инфекции ја идентификуваат дијагнозата од ПЦР

ПЦР методот помага да се идентификуваат вируси, бактерии и габи.

Најчести болести кои можат да се дијагностицираат:

Кои биолошки материјали се испитуваат

Со оглед на болеста, симптомите и целите на истражувањето за дијагностика на ПЦР може да користат било каква физиолошка течност или ткивна честичка.

Тоа може да биде:

• крв;
• плунка;
• спутум;
• урина;
• екскрета;
• rotoglot stere;
• парче погодени ткаенини;
• синанселна течност;
• стружење од вагината кај жените или од уретра кај мажи;
• ејакулација;
• коса и други.

Со болести на урогениталниот систем, урината се зема, размачка од вагината кај жените или од уретрата кај мажите. Венска крв е предадена за дијагностицирање на болести како ХИВ, хепатитис од различни видови, инфекција на факели.

Со цел да се елиминира или потврди онкологијата, за време на хируршките интервенции, парчиња ткаенина на биопсијата се повлекуваат.

Како да се подготвите за анализа

Карактеристики на подготовка за истражување зависат од биоматеријалот, кој се предава. Исто така, треба да се запомни дека е неопходно да се исклучи приемот на антибиотици и други лекови. За контрола на ефективноста на третманот, интервалот треба да биде издржлив по приемот на лекови најмалку 4 недели.

Крв се предаде од утрото на празен стомак. Наводнување и калории мора да бидат поставени во наменетите, апсолутно стерилен контејнер. Во исто време, пред да се соберат урината неопходно е да се спроведе хигиена на надворешни генитални органи.

Ако тест се пресели, мора:

• не уринирајте 3 часа;
• не е препорачливо да се измие и да се наслика во пресрет (за жени);
• дневно запре сексуален живот;
• жените од тест треба да бидат предадени во средината на циклусот.

Фази на ПЦР студии

Пред почетокот на ПЦР, ДНК мора да биде изолиран од примерокот. ДНК изолирана е повеќестепен процес кој може да се изврши рачно или инструментално.

По подготвувањето на примерокот, тристепениот PCR процес започнува:

• поделба на целна ДНК (денатурација);
• засилување (репродукција) ДНК фрагменти;
• откривање (откривање) засилени ДНК фрагменти.

Првата фаза на ПЦР го има името на денатурацијата. Нејзината суштина е дека ДНК цевка со примероци се загрева до високи температури (приближно 90 степени). Поради високите температури, слабите обврзници се уништени помеѓу нуклеотидите кои го формираат кодот на молекулите. Како резултат на тоа, се подесуваат одвојување на две заглавени ДНК или РНК во две посебни теми.

За студиите "чистота" во студираниот биоматеријал, се додава посебно решение, кое ги раствора органските супстанции. Времетраењето на оваа фаза зависи од гледиштето на материјалот во студијата и предизвикувачкиот агенс на инфекцијата.

ПЦР дијагностика (што е опишано погоре) во втората фаза, произведува репродукција на ДНК фрагменти врз основа на ДНК на инфекција. ПЦР не ја копира целата нуклеинска киселина во примерокот. Таа копира само посебна редослед на генетскиот код, краток фрагмент (буквар).

Во втората фаза, цевката за тестирање се лади. Целиот PCR процес е автоматизиран со помош на машина наречена термостат или засилувач, и може да се заврши во рок од неколку часа. ПЦР машината е програмирана за промена на температурата на реакционата мешавина на секои неколку минути. Ова се случува така што кратки фрагменти можат да контактираат со еднонасочна матрица.

Засилување се јавува во 30-40 циклуси. Во овој период, лабораторија притиснато ДНК фрагмент и го зголемува бројот на верижна реакција. Така, со секој циклус, бројот на копии се зголемува на неколку милиони или дури милијарди.

Во третата фаза од студијата, присуството на ДНК вируси и бактерии се случуваат. Ова се врши со дистрибуција на добиената мешавина и додадете посебно решение за него. Оваа течност им овозможува на ДНК фрагментите да стекнат одредена боја под дејство на ултравиолетови зраци. Ова е показател дека патогените микроорганизми се присутни во човечкото тело.

ПЦР за време на бременоста

ПЦР дијагностика (она што е опишано погоре) за прв пат може да се додели за време на бременоста, бидејќи е задолжителна постапка. Овој метод помага да се идентификуваат скриените инфекции и заканата од малформации од фетусот.

За анализа на анализа:

Постојат заразни болести кои можат негативно да влијаат на развојот на фетусот, предизвикувајќи пороци, предизвикуваат предвремени родови и спонтан абортус. Тие се особено опасни во првиот триместар од бременоста и, во повеќето случаи, се медицински индикации за прекинување на бременоста. Овие инфекции имаат општо име на факелот комплекс.

PCR анализа помага да се воспостави присуство или отсуство на инфекција во телото на бремена жена. Често се изведува во фаза на планирање на бременоста или во првиот триместар. Во случај на позитивен резултат, повторно спроведување на студија. И само по потврдувањето на резултатите, е доделен соодветен третман.

ПЦР за ХИВ дијагностика

ПЦР методот за дијагноза на ХИВ инфекција е скапа анализа и се користи за посебно сведочење. Тие вклучуваат донација, и тој може да биде назначен за пациенти погодени од автомобилската несреќа со луѓе, превозници на ХИВ.

ПЦР помага да се утврди присуството на инфекција во раните фази пред телото да генерира антитела на ХИВ. Резултатот со висок процент од веројатноста за истражување може да покаже веќе 5-14 дена по пенетрацијата на вирусот.

Во други случаи, присуството на вирус во телото на едно лице помага да се воспостави имунофармална анализа (ELISA). Ги одредува антителата на ХИВ во крвта на лице кое почнува да се произведува за 1-3 месеци по инфекцијата. Анализата на квантитативната определба на микроорганизмите е неопходна за контрола на третманот на пациентите.

ПЦР за дијагноза на хепатитис

Вирусен хепатитис Ц е тешка болест што може да доведе до развој на цирозата на црниот дроб. Во период на инкубација, кој може да биде до 12 месеци, вирусот не покажува на било кој начин, пациентот практично не е заразен, а вирусот не може да се утврди со вообичаениот тест на крвта.

Најчесто, со ненавремен третман, болеста поминува во хронична форма и се заканува со повеќе компликации.

Кога е заразен со хепатитис Б, периодот на инкубација не е толку долг и првите симптоми може да се забележат по 4 недели. Во овој период IFA може да покаже присуство на вирус во телото.

ПЦР методот ви овозможува:

• идентификувајте ја болеста во фазата на развој на инкубација;
• решавање сомнителни анализи на други студии;
• проценка на ефективноста на антивирусна терапија.

Недостатокот на вирус на хепатитис ДНК по третманот е знак на неговата ефикасност.

Анализа на туберкулоза

Развојот на туберкулоза провоцира Кох стапче, кој може да влезе во човечкото тело со воздушен капки. Болеста има две форми: скриени и отворени. Во првиот случај, заразено лице не е носител на инфекција и микобактериите во спутумот не се откриваат дури и со ПЦР. Опасност Оваа форма сè уште има, бидејќи е во состојба да се пресели во отворената фаза.

Отворената (активна) фаза е опасност за другите дури и во случај на строга усогласеност со правилата за лична хигиена. За дијагноза на болеста, се користи флуорографија и рентген на градите. Исто така, за оваа намена се користи моберкулизиран примерок (примерок од Manta). Но, најефективниот метод на истражување е ПЦР.

Како што студирале примероци користат:

• крв;
• влажни;
• течен бронхи.

ПЦР за дијагноза на ХПВ

Дијагнозата на ХПВ се спроведува во случај на симптоми на болеста, како што се папиломите и брадавиците во областа на гениталните органи. Студијата исто така е назначена на сцената на планирањето на бременоста, во случај на неплодност, спонтан абортус, како и во ситуација на инфекција на еден од партнерите, како еден од механизмите за пренесување на вирусот - сексуално.

Најопасните не е присуството на вирусот во телото, туку и неговиот тип. Некои од неговите типови (16 и 18) се високоопреозни и можат да предизвикаат рак на грлото на матката кај жените. ПЦР методот може да се додели во врска со други видови на истражувања. За анализата, најчесто се користи тест од гениталиите. Крвта, урината и нагласувањето од вагината како биоматеријал се крајно ретко се користат.

Под херпес

Овој тест дијагностицира генитална инфекција со различни херпес 1 и 2 видови (HSV1 / HSV2). Со позитивен резултат на HSV2, треба да се донесат тест за ХИВ и други СПБ. За анализата бара венска крв на пациентот.
Ние исто така можеме да ја истражиме урината, селекцијата и содржината на осип во присуство на симптоми.

Сеопфатен преглед на ПЦР

Во случај на сведочење или со цел да се спречат болестите, може да се додели комплекс на анализи од ПЦР. Најчесто, иницијаторот е самиот пациент, постојат случаи кога сеопфатен преглед е препишан за да се спречат епидемии на одредени болести во одреден регион.

PCR-12 е сеопфатна студија која ги опфаќа следните инфекции:

1. Хепатитис.
2. Херпес.
3. СПБ.
4. Туберкулоза.
5. Енцефалитис.
6. Кандидијас.
7. Инфекција со хеликоптери.
8. Цитомегаловирус.
9. Мононуклеоза.
10. Onkovirus.
11. Лисуриоза.

Дешифрирање ПЦР анализа

По анализирањето на методот ПЦР, може да се објави позитивен или негативен резултат.

Резултатите од ПЦР дијагностиката изгледаат вака. Што е тоа и како да се дешифрирате му кажува на докторот

ПЦР дијагностичка прецизност

Во повеќето случаи, PCR дијагностиката обезбедува високи прецизни резултати. Но, во некои случаи, потребни се дополнителни истражувачки методи за да се потврди точноста на дијагнозата.

Зошто може да се добие лажен резултат?

Лажните позитивни резултати може да резултираат со непочитување на правилата за собирање на анализата и самата процедура за студирање.

Самиот пациент може да биде виновник на лажна информација во случај на неправилна подготовка за лизинг на биоматеријал. Опремата на лабораторијата и професионалноста на лекарот може директно да влијае на резултатите од студијата.

Каде да помине ПЦР дијагностика

ПЦР дијагностиката е направена во приватни клиники и лаборатории за назначување на докторот или на иницијатива на самиот пациент со цел да се спречи.
Предност треба да се даде на клиниките и лабораториите со модерна опрема, кои не постојат првата година на медицинскиот пазар и се докажаа.

ПЦР анализа: цена и тајминг

Овој дијагностички метод се карактеризира со висока цена. Неговата цена се движи од 200 до 500 рубли по лице. Сеопфатен преглед за неколку инфекции може значително да се спаси, во споредба со плаќањето на секое поединечно истражување.

Периодот на студијата зависи од видот на инфекцијата и може да потрае од 1 до 5 дена. Исто така, овие показатели зависат од опремата на лабораторијата и квалификациите на медицинскиот работник.

PCR дијагностика (за она што е детално опишано во овој член) е најточниот и брз истражувачки метод. Тоа е едно од најважните откритија во XX уметноста. во Medecine.

Благодарение на овој метод, комплетен лек од многу болести стана е можно. Но, не заборавајте дека ПЦР има некои недостатоци, а неговата ефикасност понекогаш се зголемува заедно со други истражувачки методи.

Чистење на статијата: Владимир Велики

Видео за PCR дијагностика

За ПР точноста: