Sanitær mikrobiologi. Mikrobiologiske indikatorer for OKB og TKB i vand

I hjertet af hygiejniske krav til vandkvalitet til drikkevand og indenlandske behov er det et princip, der er placeret i kvaliteten af \u200b\u200bvandkvaliteten af \u200b\u200bvand, på hvem det menneskelige sundhed og betingelserne i hans liv afhænger. I overensstemmelse med den moderne sanitære lovgivning bør drikkevand være sikker i epidemisk og strålingsforhold, harmless for kemisk sammensætning og har gunstige organoleptiske egenskaber.

Sikkerheden ved drikkevand i en epidemisk holdning bestemmes af dens overholdelse af reglerne for mikrobiologiske indikatorer. Den mikrobiologiske sammensætning af drikkevand er hovedindikatoren for forbrugets kvalitet og egnethed. Samtidig tages både bakteriel og viral forurening i betragtning.

Epidemiologisk sikkerhed ved drikkevand i Sainpin anslås til flere indikatorer. En stor rolle blandt dem er tildelt termotoletephider som sande indikatorer for fækalforurening og fælles colormum.

Fælles coliforme bakterier (OKB) - Gram-negative, oxid-zenerous, ikke-dannende sporer af pinde, der kan vokse på differential lactose medier, der fermenterer lactose til syre og gas ved en temperatur på +37 i 24-48 timer.

De termotlaterede coliforme bakterier (TKB) er en del af OKB og har alle deres tegn, men i modsætning til dem er de i stand til at fermentere lactose til syre, aldehyd og gas ved en temperatur på +44 i 24 timer. Således adskiller TKB fra OKB-evnen til at fermentere lactose til syre og gas ved en højere temperatur. Termiske rejsende og generelle coliformer skal være fraværende i 100 ml drikkevand (i en af \u200b\u200bprøverne med tre-time analyse gentagelse).

I distributionsnettet af store centraliserede drikkevandsforsyningssystemer (med antallet af prøver under undersøgelse mindst 100 om året) er 5% af ikke-standardprøver tilladt på fælles colormer, men ikke i to konsekvent udvalgte prøver på et tidspunkt.

Det samlede antal mikroorganismer (det totale mikrobielle nummer - OMC) bestemmes af væksten på kødet TePton Agar ved inkubationstemperatur 37. Denne indikator bruges til at karakterisere effektiviteten af \u200b\u200brengøring af drikkevand, det skal overvejes, når man overvåger vandkvaliteten i dynamikken. Den skarpe afvigelse af OMC selv inden for reguleringsværdien (men ikke mere end 50 pr. 1 ml) tjener som et signal for overtrædelse i vandbehandlingsteknologi. Væksten i OMH i distributionsnetværkets vand kan indikere dets ugunstigt stillede hygiejneforhold, hvilket bidrager til reproduktion af mikroorganismer på grund af akkumulering af organiske stoffer eller lækage, hvilket medfører klatrer af forurenet grundvand.

Aerobic saprophytes udgør kun en del af det samlede antal mikrober i vand, men er en vigtig sanitetsindikator for vandkvaliteten, da der er direkte afhængighed mellem dets organiske stoffer og mikrobielle tal. Derudover antages det, at jo højere det generelle mikrobielle nummer, desto større er sandsynligheden for tilstedeværelsen af \u200b\u200bpatogene mikroorganismer i vandet. Et mikrobielt tal i ledningsvand må ikke overstige 100.

Sikkerheden ved drikkevand i en epidemisk relation bestemmes af dets overholdelse af reglerne for mikrobiologiske indikatorer (tabel 1).

Tabel 1. Mikrobiologiske indekser af drikkevand

Begrebet hygiejne mikroorganismer

Grundlæggende krav til sanitetsmikroorganismer: 1. De skal have et fælles naturligt habitat med patogene mikroorganismer og tildele til det eksterne miljø i stort antal; 2. I den eksterne habitat skal sanitære vejledende mikroorganismer være ensartet fordelt og mere stabile jævnt end patogen. De bør forblive i vand længere, praktisk talt uden at multiplicere, have større stabilitet i virkningerne af forskellige ugunstige faktorer, de skal svinge i mindre grad variabiliteten af \u200b\u200begenskaber og tegn i mindre grad; 3. Metoder til bestemmelse af hygiejne mikroorganismer skal være enkle og have en tilstrækkelig grad af pålidelighed.

Fra stillingen af \u200b\u200bsanitær mikrobiologi udføres vandkvalitetsvurderingen for at bestemme dets sanitære og epidemiologiske fare eller sikkerhed. For menneskers sundhed. Vand spiller en vigtig rolle i overførslen af \u200b\u200bårsagsmidler af mange infektioner, især tarm.

Direkte kvantitativ definition af alle infektioner for at kontrollere vandkvaliteten er umulig på grund af mangfoldigheden af \u200b\u200bderes arter og kompleksitet af analysen.

Analyse af kun en vandprøve for den mulige tilstedeværelse af årsagsmidler af abdominal tyfoider, paratifa A, parasip in, dysenteret, infektiøs gulsot, akvatisk feber og tularemia vil fuldt ud udnytte hele personalet selv et stort bakteriologisk laboratorium. Desuden vil svaret i denne sag kun blive givet efter 2-3 uger, dvs. Så, når befolkningen har længe drak det studerede vand.

I betragtning af den åbenlyse uhensigtsmæssighed af en detaljeret bestemmelse af miljømirektiviseringen af \u200b\u200bvand i slutningen af \u200b\u200bXIX århundrede blev der forsøgt at erstatte søgningen efter alle vandige patogene mikrober med en hvilken som helst mikrobe til selv ikke-patogen, men men konstant til stede i menneskelige afføring. Så ville det være muligt at antage, at hvis vandet under studie er virkelig forurenet med afføring, kan det være farligt for at drikke, for blandt en sund befolkning kan både syge og rettelser forekomme blandt en sund befolkning. Søgningen efter sådanne bakteriologiske indikatorer for fækalforurening blev kronet med succes. Det viste sig, at i afføringen af \u200b\u200ben person er der konstant til stede tre efter mikrober: 1) intestinale sticks; 2) Enterococci; 3) Anaerobe Spore-dannende bakterier, hovedsagelig BAC. Perfingens.

Således dominerer intestinal WAND i indenlandske spildevand. Men punktet er ikke kun i sit større indhold. Den grundlæggende værdi af bakterielindikatoren for fækalforurening er at sikre, at hastigheden af \u200b\u200bdens dyse i de fleste patogene mikrober. Kun under denne tilstand vil mikrobe, der konstant er til stede i afføring af mennesket, en indikator for fækalforurening.

Hvis der fra dette synspunkt for at nærme sig de tarmiske faste indbyggere opdaget, så vil følgende være: Mikrober af BAC Group. Perfingens fortsætter i vand, en masse længere patogene mikrober; Enterococci, tværtimod, dø meget mere snart; Hvad angår intestinalpindet, svarer tidspunktet for bevarelsen i vand omtrent til tidspunktet for overlevelse af patogene mikrober.

Derfor er den vigtigste hygiejne og bakteriologiske indikator for vand og er en tarmstang. Kun i Rusland, det eneste land i verden, styres vandkvaliteten af \u200b\u200bbakterien i tarmpindgruppen (BGPP-indekset). Denne gruppe omfatter alle repræsentanter for gruppen af \u200b\u200bintestinale bakterier og betingede patogene repræsentanter.

I overensstemmelse med GOST 2874-73 og GOST 18.963-73 indbefatter bakterierne af intestinalsticksgruppen (BGPP) gram-negative, ikke-dannende sporer af spisepinde, hvilket sparer lactose eller glucose til syre og gas ved 37 ° C 24 timer og ikke besidder oxidaseaktivitet. BGPP omfatter repræsentanter for forskellige slags - Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, men de skiller sig alle ud i miljøet fra tarmene af en person og dyr. I den henseende bør deres påvisning i miljøet betragtes som en indikator for fækalforurening.

Fra fødslen af \u200b\u200bBGC'er har den mest sanitære værdi en genus af Escherichia. Tilstedeværelsen af \u200b\u200balle disse bakterier i miljøet betragtes som frisk fækalforurening.

Escherichia - er en af \u200b\u200bbaggrundstyper af menneskelige og dyreintestins. Escherichia-slægten, herunder et typisk billede af E. coli, en indikator for frisk fækal forurening, en mulig årsag til toksikinfektioner. Repræsentanter for slægten i vand tolkes som termiske strukturelle coliforme bakterier.

Citrobacter er beboet i spildevand, jord og andre genstande af det ydre miljø, såvel som i afføring af sunde og patienter af mennesker. Henvisning til en gruppe af betingede patogene bakterier. (Mikrobiologisk Directory, 1999)

Til ulemperne ved Cytterobacter som en GPO omfatter følgende:

1. Overflod af analoger i det eksterne miljø.

2. Variabilitet i det eksterne miljø.

3. Utilstrækkelig modstand mod bivirkninger.

4. Evnen til at reproducere i vand.

5. Fuzzy indikator selv med hensyn til tilstedeværelsen af \u200b\u200bSalmonelle.

Undersøgelser af de seneste år afslørede manglen på direkte korrelation mellem tilstedeværelsen af \u200b\u200bpatogene bakterier og indikatorer i vand. I regionerne med en intens antropogen belastning på vandlegemer noteres et fald i indholdet af indikatormikroorganismer med en ændring i deres biologiske og kulturegenskaber på baggrund af den kvantitative overvejelse af potentielle patogene og patogene bakterier.

Enterobacter - Inhave tarmene af mennesket og andre dyr, findes i jord, vand, fødevarer, appelintarm, urogenital, respiratoriske, purulente inflammatoriske sygdomme hos en person.

Klebsiellah - Dwell i vand, jord, i fødevarer, i tarmene og åndedrætsanfald af mennesker, pattedyr, fugle.

I 1910. Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium) foreslås for SPMO's rolle.

Enterococci - slægten af \u200b\u200bvalgfri anaerobe hydrogen kemologorotrofiske gram + bakterier. Polymorfe celler. Udbredt i naturen. De er en af \u200b\u200bderes baggrundsarter af menneskets tarm, pattedyr, fugle. Ofte findes de i floraen af \u200b\u200bhuden af \u200b\u200bperineum og sexkanalen, hulrummene i næse, svælg, næse. I lang tid overlever i jorden, fødevareprodukter.

Fordelene ved Enterococcus som en GPO:

1. Konstant er i tarmene af en person og står konstant ud i det eksterne miljø. Samtidig lever Enterococcus faecalis hovedsagelig i tarmene af en person, så detektion bedømmer for kontaminering af afføring af mennesker. I mindre grad har personen enterococcus faecium. Sidstnævnte findes hovedsagelig til tarmene af dyr, selvom Enterococcus faecalis også er slappe af sjældent.

2. Det er ikke i stand til at multiplicere i et eksternt miljø, Enterococcus faecium multipliceres stort set, men det har en mindre epidemiologisk værdi.

3. Ændrer ikke sine egenskaber i det eksterne miljø.

4. Der er ingen analoger i det eksterne miljø.

5. Modstandsdygtig over for bivirkninger af det eksterne miljø. Enterococcus 4 gange mere modstandsdygtig over for klor i forhold til tarmstaven. Dette er hans vigtigste værdighed. Takket være denne funktion anvendes Enterococcus, når du kontrollerer kvaliteten af \u200b\u200bvandchlorering, samt en indikator for kvaliteten af \u200b\u200bdesinfektion. Modstår temperaturen på 60 ° C, hvilket gør det muligt at blive brugt som en indikator for kvaliteten af \u200b\u200bpasteurisering. Modstandsdygtig over for koncentrationer af bordsalt 6,5-17%. Resistent over for pH i området 3-12.

6. For at angive enterokokker er der udviklet højt selektive miljøer. Overlevelsesraten for Enterococcus i vand nærmer sig overlevelse af patogene enterobakterier. Enterococcus er retmæssigt den anden efter en tarmpind med en hygiejneprøve, når du studerer drikkevand.

I øjeblikket er enterokometri fængslet i den internationale standard for vand, som en indikator for frisk fækalt forurening. Når der findes atypiske tarmkantager i vandet, bliver tilstedeværelsen af \u200b\u200benterococci hovedindikatoren for frisk fækalt forurening. Desværre er der i Sanpin 2.1.4.1074-01nu drikkevandsbestemmelse af Enterococcus ikke givet.

En gruppe af proto betragtes som gerningsmænd af putrefaktive processer i naturen og følgelig som indikatorer for tilstedeværelsen af \u200b\u200borganiske stoffer i vandvand. Dette gælder primært en art - pr.vulgaris; Den anden type er pr.mirabilis - Intainter i tarmene af en person og dyr. Denne miljøforskel gjorde det muligt at bedømme karakteren af \u200b\u200bvandforurening og graden af \u200b\u200bdens epidemiske sikkerhed. PR.VULGARIS kan være en indikator for fækalforurening, pr.vulgaris er en indikator for en stigning i økologisk stofkoncentration overhovedet. Svaghederne i denne indikator er ikke-permanent tilstedeværelse - pr.mirabilis i tarmene af en person og evnen til en ret intensiv gengivelse af begge typer i vand. Der er heller ingen forskningsmetode, der ville tillade differentielt at tage hensyn til begge typer med samtidig tilstedeværelse i testprøven. Den foreslåede metode udfører ikke denne opgave.

I øjeblikket er det vist, at bakterierne i proteusgruppen findes i 98% af tilfælde i udledning af tarmene af en person og dyr, hvoraf 82% af tilfældene er pr.mirabilis. Påvisningen af \u200b\u200bvirkningen i vand indikerer forureningen af \u200b\u200bobjektet ved dekomponerende substrater og indikerer den ekstreme hygiejneforstyrrende. Proteometri er officielt anerkendt i USA.

Påvisningen af \u200b\u200bsulfiducleering af clostridium udføres på vandforsyningssystemer fra overfladekilder for at vurdere effektiviteten af \u200b\u200bforarbejdning af vand. Tvister af sulfiderede generationsbakterier bør ikke være til stede i 20 ml drikkevand efter afslutningen af \u200b\u200bvandbehandling.

Koliphages er inkluderet som en indikator for viral forurening af drikkevand til Sanpin, som ifølge deres biologiske oprindelse, størrelser, egenskaber, miljøfaktorer, er tættest på tarmvirus. Koliphaga bør ikke påvises i 100 ml behandlet drikkevand.

Intestinal wand (Escherichia coli) Det er den mest første sanitære vejledende mikroorganisme, der har holdt sin værdi hidtil. Tilbage i 1888 foreslog den franske læge E. Masya at anvende denne bakterie som en indikator for fækalforurening af vand. I den tredje udgave af WHO-vejledningen til at kontrollere kvaliteten af \u200b\u200bdrikkevand som en indikator for valg til estimering af frisk fækalforurening, anbefales en E. coli (indeks) indikator. Som en alternativ indikator for fækalforurening (under visse omstændigheder) anbefales indikatoren for termotraktor coliforme bakterier (TKB) (indeks). Parameterbakterier (CB) indikatoren anbefales som en teknologisk indikator for vurdering af kvaliteten af \u200b\u200bvandbehandling (indikator). Ifølge den indenlandske reguleringsramme svarer de coliforme bakterier (CB) i WHO-terminologi til indikatoren for fælles coliforme bakterier (OKB).

For at bestemme coliformeindikatorerne anvendes membranfrømetoden i vid udstrækning, selvom titreringsmetoden også har en betydelig værdi. Metoder til bestemmelse af disse indikatorer varierer meget afhængigt af objektet under studie- og reguleringsdokumenter. Det vigtigste tætte differentieringsmiljø for at bestemme de koliforme indikatorer i indenlandske teknikker er endo-miljøet, men i den seneste udgave af ISO 9308-1: 2000-standarden erstattes endo med et andet laktosemedium - Tergitol 7.. Årsagen til en sådan substitution var den potentielle carcinogenicitet af fuccin-anilinfarvestof, som er en del af endo-miljøet. For NVC-metoden anvendes flydende berigelsesmedier. For potentielt rene genstande anvendes lactose-peptosevand til potentielt forurenet cesslermedium eller dets analoger.

Det er nødvendigt at bemærke næringsmediet i den nye generation, som ofte kaldes "kromogen". I modsætning til traditionelle omgivelser gør de det muligt at bestemme ikke et tegn, såsom udnyttelsen af \u200b\u200blactose, men direkte individuelle enzymer, hvis tilstedeværelse er karakteristisk for de ønskede mikroorganismer. Kromogene medier til at identificere E. coli, for eksempel, Chromocult ®. eller coli id, det tillader at bestemme enzymet β-glucuronidase, meget specifikt for Earsech. Tilstedeværelsen af \u200b\u200bdette enzym og evnen til at danne en indol med en 95% sandsynlighed indikerer et tilbehør til enterobakterier til typen af \u200b\u200bE. coli. De samme medier gør det muligt at bestemme β-galactosidaseenzymet karakteristika for OKB, men værdien af \u200b\u200bdenne diagnostiske test er tvivlsom: Aeromonader har begge aeromonader, frie levede oxidazo-positive wands, der ikke er relateret til OKB. Merck forsøgte at forbedre det kromogene miljø Chromocult ec. og indført i det et selektivt additiv, der hæmmer væksten af \u200b\u200baeromonaden.

Fra innovative teknologier inden for hygiejnebakteriologi af vand bør testsystemer noteres ved hjælp af tørre miljøer på specielle plastsubstrater. Et eksempel på sådanne testsystemer er substrater Petrifilm ™.herskere. Aqua. Og især produktet Aqua Coliform Tal Plate (AQCC, 3M ™ Petrifilm ™)som er designet til at bestemme OKB og TKB i vand. Unikheden af \u200b\u200bpetrofilms (medier på substrater) er brugervenlighed. Den tidskrævende fase af fremstilling af næringsmedier elimineres, deres opbevaring og bortskaffelse lettes. Den største fordel i forhold til traditionelle medier og medier på de andre producenters substrater er imidlertid, at allerede i det primære såningsstadium, når de modtages isolerede kolonier, gør det muligt at bestemme ikke kun bakteries evne til at bortskaffe lactose til syre, Men også for at identificere gasdannelse. Dette tillader i de fleste tilfælde at reducere analysen til 1-2 dage. Derudover kan petrofilms AQCC (i modsætning til endo-miljøet) inkuberes ved 44 ° C, hvilket giver dig mulighed for fuldt ud at bruge den selektive faktor for høj temperatur allerede i det primære såningsstadium, så når du analyserer TKB, tid og kompleksitet er væsentligt reduceret.

På selektive petrilimmer Aqua Coliform Tal Plate (AQCC, 3M ™ Petrifilm ™) Kolonier af OKB og TKB er malet i en intens rød farve med dannelsen af \u200b\u200bgasbobler omkring kolonien.

OKB er internationale kvalifikationer, og de er inkluderet i den store gruppe BGPP (bakterier af gruppen af \u200b\u200bintestinal sticks). Indholdet af OKB vand kan bestemmes ved to metoder: metode til membranfiltre og en titrering (fermentation) metode.

Undersøgelse af vand ved membranfiltre. Metoden er baseret på at filtrere den etablerede mængde vand gennem membranfiltre, voksende afgrøder på et differentialdiagnostisk miljø og den efterfølgende identifikation af kolonier på kultur og biokemiske træk.

Tutationsmetode for vandforskning. Fremgangsmåden er baseret på akkumulering af bakterier efter såning af det etablerede volumen vand i et flydende næringsmedium, efterfulgt af rekreation på differentialdiagnostisk miljø og identificerende kolonier på kultur og biokemiske tests.
"Kolimiformsorganismer" tilhører klassen af \u200b\u200bGram-negative bakterier i form af pinde, der lever og formidler i den nederste del af den menneskelige fordøjelseskanal, og de mange dyr har varmt blod som - indenlandsk kvæg og vandfugle, der er i stand til at fermentere lactose ved 35-37 ° C med syreformation, gas og aldehyd. At finde i vandet med fækale lagre, de er i stand til at overleve i flere uger, selv om de i det overvældende flertal bliver frataget evnen til at formere sig.

Ifølge de seneste undersøgelser, sammen med normalt relateret til denne klasse, omfatter Escherichia bakterier (E. coli), Citrobacter, Enterobacter og Klebsiela og i stand til at fermentere lactose bakterier enterobacter cloasae og citrobader freundii. Disse bakterier kan findes ikke kun i afføring, men også i miljøet og endda i drikkevand med en relativt stor koncentration af næringsstoffer. Derudover er det muligt at tildele arter, der sjældent eller slet ikke findes i afføring og i stand til at multiplicere nok god kvalitet i vandet.

TKB - Termotraktable coliforme bakterier. Antallet af TKB karakteriserer graden af \u200b\u200bfækal forurening af vand af vandområder og bestemmer indirekte epidemisk risiko for patogener af intestinale infektioner. TKB bestemmes af de samme metoder som BGPP (OKB).
Prøveudtagning for sanitær og mikrobiologisk forskning bør udføres i overensstemmelse med reglerne for sterilitet og alle ikke-akkrediterede betingelser, der er reguleret for hvert objekt under undersøgelse med relevante lovgivningsmæssige dokumenter.

Fejl foretaget, når de tager prøver, fører til forkerte resultater. Når du pakker og transporterer prøver, er det nødvendigt at skabe forhold, der udelukker død eller reproduktion af den originale mikrobiota i objektstudiet. Derfor bør udvalgte prøver foretages så hurtigt som muligt på laboratoriet for forskning.

I dette tilfælde føres fremgangsmåden til analyse af vand, en vis mængde vand gennem en speciel membran med en porestørrelse på ca. 0,45 μm. Som følge heraf forblev alle bakterierne på overfladen af \u200b\u200bmembranen. Derefter placeres membranen med bakterier på et bestemt tidspunkt i et specielt næringsmedium ved en temperatur på 30-37 ° C. I løbet af denne periode, kaldet inkubation, får bakterier mulighed for at formere sig og danne velafbrydelige kolonier, der allerede er let beregnet. Som følge heraf kan du observere sådanne: eller endda et sådant billede:

Da denne metode til vandanalyse kun påtager sig definitionen af \u200b\u200bdet samlede antal kolonier - dannelse af bakterier af forskellige typer, så ifølge dets resultater er det umuligt at dømme tilstedeværelsen af \u200b\u200bpatogene mikrober i vand. Et højt mikrobielt tal angiver imidlertid den overordnede bakteriologiske forurening af vand og den høje sandsynlighed for tilstedeværelsen af \u200b\u200bpatogene organismer.

Ved analyse af vand bør ikke kun overvåges indholdet af toksiske kemikalier, men også antallet af mikroorganismer, der karakteriserer den bakteriologiske forurening af drikkevand OMCH-totalt mikrobielt nummer. I vandet med centraliseret vandforsyning må dette tal ikke overstige 50 CFU / ml, og i brønde, brønde - ikke mere 100 cfu / ml

Sanitær og mikrobiologisk undersøgelse af vand udføres i planen
Bestil med henblik på nuværende tilsyn, såvel som på særlige epidemiologiske
Kim Vidnesbyrd. Hovedformålene ved en sådan forskning er:

- drikkevand af central vandforsyning (ledningsvand);

- drikkevand af ikke-centraliseret vandforsyning

- vand af overflade- og underjordiske vandkilder

- spildevand;

- Vand af kystzoner af havene

- Vandswimmingpools.

Hovedindikatorerne for vurderingen af \u200b\u200bden mikrobiologiske tilstand af drikkevand i henhold til de nuværende lovgivningsmæssige dokumenter er:

1. Et generelt mikrobielt tal (OMCH) er mængden af \u200b\u200bmesofile bakterier i 1 ml ox.

Hvis titer.- det mindste vandvolumen (i ml), hvor mindst en levende blev detekteret
Mikrobiel celle tilhørende BGPP.
Indeks bgkp.- Antal BGPP i 1 liter vand.

3. Antallet af sulfut-adskillelse af Clostrid i 20 ml vand.

4. Antallet af coliphecks i 100 ml vand.

Definitionen af \u200b\u200bOMC gør det muligt at estimere niveauet for mikrobiologisk forurening af drikkevand. Denne indikator er uundværlig for akut påvisning af massiv mikrobiel forurening.

Generelt Microbial Number. - Dette er antallet af mesofile aerobiske og valgfrie anaerobe mikroorganismer, der er i stand til at danne 37 ° C på næringsagar i en alder af 37 ° C og løbet af 24 timers koloni, synlig ved en dobbelt zoom.

Ved bestemmelse af det totale mikrobielle tal fremstilles 1 ml af vandet under undersøgelse i en steril petriskål og hældt 10-12 ml varmt (44 ° C) smeltet næringsstof agar. Mediet omrøres forsigtigt med vand, jævnt og
Uden luftbobler, distribuerer langs bunden af \u200b\u200bkoppen, hvorefter den er lukket med et låg og lades til frosne. Sevinger inkuberes i en termostat ved 37 ° C i 24 timer. Beregn det samlede antal kolonier, der er vokset i begge kopper, og bestemme gennemsnitsværdien. Det endelige resultat udtrykkes af antallet af kolonidannende enheder (kode) i 1 ml af vandet under studie. I 1 ml drikkevand bør ikke være mere end 50

Definition af BGCP.
Samtidig bestemmes generelle coliforme bakterier - OKB og termiske optomiske coliforme bakterier - TKB.

OKB er gramotrictant, ikke-prøver af pinde, der fermenterer lactose til syre og gas ved 37 ° C i 24 48 timer. TKB er inkluderet i antallet af OKB, de har dem tegn, men fermentering ved 44 ° C. For definitionen af \u200b\u200benterobakterier - metoden til ovnfiltre eller titrering.

Mikrobielt nummer - de vigtigste kriterier for estimering af den mikrobiologiske tilstand af drikkevand, Baseret på de eksisterende reguleringsdokumenter er det et OMC (General Microbial Number), som karakteriserer antallet af aerobic og anaerobe bakterier i en millilitress af vandkræfter i en dag ved en temperatur på 37 grader i næringsmediet.

Kvalitative indikatorer forer.

Denne indikator er faktisk uundværlig for hurtig påvisning af masse mikrobiel forurening.

Til definitioner af det samlede mikrobielle nummer En milliliter af det studerede vand bringes i en steril petriskål, derefter hældt 10-15 ml varmt (ca. 44 ° C) af næringsagaren i smeltet form. Mediet blandes forsigtigt med vand, jævnt og uden luftbobler, er luften fordelt langs bunden af \u200b\u200bkoppen, så lukkes den med et låg og forlader i Petri Cup til frostet. Det samme sker i en anden kop. Såningstermostat inkuberes ved en temperatur på 37 ° C i dagevis. Derefter med en dobbelt forstørrelse beregner et mikroskop det samlede antal kolonier, der voksede i to kopper, og bestemme gennemsnitsværdien. I 1 ml drikkevand bør der ikke være mere end 50 kone.

(hovedmetode)

Fremgangsmåden er baseret på at filtrere et bestemt volumen vand (300 ml) gennem membranfiltre, criting afgrøder på et differentialdiagnostisk medium med lactose (Endo) og den efterfølgende identifikation af kolonier på kultur og biokemiske træk.

Membranfiltre fremstillet til analyse (kogt eller steriliseret af en anden) anbringes sterile pincet i tragten af \u200b\u200bfilterapparatet. Et ment vand hældes i enhedens tragt og skabe et vakuum. Efter filtrering fjernes filteret, og uden drejning sættes på overfladen af \u200b\u200bendo næringsmediet.

En kop kan placeres 3 filtre. I undersøgelsen af \u200b\u200bdrikkevand filtreres 3 volumener på 100 ml. Ved analyse af vandet af ukendt kvalitet er det tilrådeligt at filtrere andre mængder vand for at opnå isolerede kolonier på filteret (10,40, 100 og 150 ml).

Kopper med filtre inkuberes på hovedet i termostaten ved T 37 ° C i 24 timer.

Hvis der ikke er nogen vækst på filtre eller untypical film, skimmelsvamp, slørede kolonier, giv et negativt resultat. OKB og TKB i 100 ml vand studeret er fraværende.

Når man vokser på filtre af typisk isoleret lactose-positiv (mørk rød med fingeraftryk på bagsiden af \u200b\u200bfilteret), beregner kolonierne deres antal og fortsætter med at bekræfte deres tilbehør til OKB og TKB.

Gennemfør mikroskopi af smøre på 3-4 kolonier, der er malet i gram (taget i betragtning Gram-negativ);

Tilstedeværelsen af \u200b\u200boxidase bestemmes (oxidase-negative, fordi oxidazo-negative gram-negative sticks ikke er relateret til enterobacterier, og kan for eksempel være pseudomonader);

Bestem fermenteringen af \u200b\u200blactose til syre og gas ved en temperatur på 37 ° C, hvilket er vigtigt for svagt farvede kolonier og deres relationer til OKB og en temperatur på 44 ± 0,5 ° C for at løse spørgsmålet om deres tilbehør til TKB .

Staging Oxidase Test.

På papir, fugtet med 1% alkoholisk opløsning af a-naphthol og 1% vandig opløsning af dimethylphenylendiamin, påføres en platinløjfe eller en glasstangsdel af den malede koloni. Reaktionen anses for positiv, hvis inden for 1 minut vises maksimum 4 eller violetfarvningen. Oxidazo positive kolonier tager ikke højde for, og yderligere forskning er ikke underkastet.

Du kan overføre filteret med kolonierne på papir fugtet med et reagens. Du kan bruge færdige papirsystemer (SIBS) fugtet med destilleret vand.

Evnen til at ferent lactose oplever dele af kolonier af gram-negative oxidase-negative bakterier. Den anvender et halvflydende medium med lactose og pH-indikator. Såning er lavet til bunden til bunden i 2 reagensglas. Den ene inkuberes ved en temperatur på 37 ± 1 ° C 24-48 timer for at bekræfte forholdet til OKB, den anden ved en temperatur på 44 ± 0,5 ° C er 24 timer, det er muligt at optage efter 4-6 timer, at bekræfte tilstedeværelsen af \u200b\u200bTKB.

Ved påføring af kolonier på filteret fremstilles deres ravings, så de resulterende isolerede kolonier identificeres. Kolonier tager hensyn til både OKB - hvis de er røde på Endo, indeholder gram-negative oxidase-negative sticks, dekomponerende lactose ved en temperatur på 37 ° C til syre og gas. Kolonier tages i betragtning som TKB, hvis de indeholder gram-negative oxidase-negative pinde, der fermenterer lactose ved en temperatur på 44 ° C til syre og gas (skema nr. 2).

Skema nummer 2.

Offentliggørelsesdato: 2014-11-02; Læs: 1811 | Overtrædelse af ophavsretsside

studopedia.org - Studdiadia.org - 2014-2018. (0.001 c) ...

Generelt Microbial Number.